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ELISA試劑盒,試劑、抗體,標(biāo)準(zhǔn)品,、蛋白,對(duì)照品、中檢所,實(shí)驗(yàn)外
普通會(huì)員
產(chǎn)品價(jià)格￥1100.00元/盒
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最小起訂未填
供貨總量1000000 盒
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更新日期2021-11-18 02:06
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聯(lián)系地址：中國(guó)上海黃浦區(qū)上海市楊浦區(qū)翔殷路128號(hào)12號(hào)樓二樓B座503室
品牌： |
未填 |
所在地： |
上海 |
起訂： |
未填 |
供貨總量： |
1000000 盒 |
有效期至： |
長(zhǎng)期有效 |
檢測(cè)方法： |
酶聯(lián)免疫 |
產(chǎn)地： |
上海 |
| 檢測(cè)方法 | 酶聯(lián)免疫 |
|---|---|
| 產(chǎn)地 | 上海 |
| 類(lèi)型 | 試劑盒 |
| CAS | KS10649 |
| 品牌 | 科順生物 |
| 加工定制 | 是 |
小鼠(PP)ELISA試劑盒
使用說(shuō)明書(shū)
檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被小鼠(PP)捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照,、樣本,、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的小鼠(PP)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值）,，判斷樣品是否含有小鼠(PP)。
樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后,，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝,，凍存于-20℃,，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
自備物品
1. 酶標(biāo)（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL、20-200uL,、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在2-8℃,，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,，密封（低溫干燥）保存。
3. 預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋?zhuān)苯尤?0μL加樣即可,。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻,。
試劑盒組成
| 名稱(chēng) | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
| 微孔酶標(biāo)板 | 96孔 | 48孔 | 無(wú) |
| 陰性對(duì)照 | 0.3mL | 0.3mL | 無(wú) |
| 陽(yáng)性對(duì)照 | 0.3mL | 0.3mL | 無(wú) |
| 樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無(wú) |
| 檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無(wú) |
| 20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 無(wú) |
| 底物B | 6mL | 3mL | 無(wú) |
| 終止液 | 6mL | 3mL | 無(wú) |
| 封板膜 | 2張 | 2張 | 無(wú) |
| 說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 | 無(wú) |
| 自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無(wú) |
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1：20稀釋?zhuān)?份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水,。
洗板方法
1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,，在吸水紙上拍干，如此洗板5次,。
2. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL,，浸泡1min,，洗板5次。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔,，陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各50μL,；
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,，再加樣本稀釋液40μL；
4. 隨后陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）,。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi),，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
結(jié)果判斷
1. 試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00,；
陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15,。
2. 臨界值（Cut off）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
3. 陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性
4. 陽(yáng)性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off）,，樣品為陽(yáng)性
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00,；陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15，說(shuō)明試驗(yàn)結(jié)果有效,。
2. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng),。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%,。
4. 貯藏：2-8℃,，避光防潮保存,。
5. 有效期：6個(gè)月
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),，否則所產(chǎn)生的一切后果,，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé),。
2. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,，實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),。
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