ELISA試劑盒,試劑,、抗體,標準品、蛋白,對照品,、中檢所,實驗外
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更新日期2022-01-20 17:06
品牌： |
未填 |
所在地： |
上海 |
起訂： |
≥1 盒 |
供貨總量： |
1000000 盒 |
有效期至： |
長期有效 |
檢測方法： |
酶聯免疫 |
產地： |
上海 |
| 檢測方法 | 酶聯免疫 |
|---|---|
| 產地 | 上海 |
| 類型 | 試劑盒 |
| CAS | KS10534 |
| 品牌 | 科順生物 |
| 加工定制 | 是 |
樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管,，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后,，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或抗凝,。3000轉離心30分鐘取上清,。
3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉離心10分鐘取上清,。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝,，凍存于-20℃,，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
自備物品
1. 酶標（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL、20-200uL,、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃,，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,，這屬于正?，F象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用,。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,，密封（低溫干燥）保存。
3. 預處理后的樣本無需稀釋,，直接取10μL加樣即可,。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作,。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻,。
試劑盒組成
| 名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
| 微孔酶標板 | 96孔 | 48孔 | 無 |
| 陰性對照 | 0.3mL | 0.3mL | 無 |
| 陽性對照 | 0.3mL | 0.3mL | 無 |
| 樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
| 檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
| 20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 無 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 無 |
| 終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
| 封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
| 說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
| 自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水,。
洗板方法
1. 手工洗板：甩盡孔內液體,，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體,，在吸水紙上拍干,，如此洗板5次。
2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min,，洗板5次,。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設置陰,、陽性對照孔和樣本孔，陰,、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照各50μL；
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,，再加樣本稀釋液40μL,；
4. 隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL，37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值,。
結果判斷
1. 試驗有效性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00,；
陰性對照孔OD值平均值≤0.15。
2. 臨界值（Cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
3. 陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off）,，樣品為陰性
4. 陽性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off）,，樣品為陽性
試劑盒性能
1. 準確性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00；陰性對照孔OD值平均值≤0.15,，說明試驗結果有效,。
2. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
3. 重復性：板內,、板間變異系數均小于15%。
4. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存,。
5. 有效期：6個月
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果,，由實驗者承擔,，本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作,，實驗者違反說明書操作,，后果由實驗者承擔。
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