ELISA試劑盒,試劑,、抗體,標(biāo)準(zhǔn)品,、蛋白,對(duì)照品,、中檢所,實(shí)驗(yàn)外
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更新日期2022-01-20 18:48
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品牌: |
未填 |
所在地: |
上海 |
起訂: |
≥1 盒 |
供貨總量: |
1000000 盒 |
有效期至: |
長期有效 |
檢測(cè)方法: |
酶聯(lián)免疫 |
產(chǎn)地: |
上海 |
檢測(cè)方法 | 酶聯(lián)免疫 |
---|---|
產(chǎn)地 | 上海 |
類型 | 試劑盒 |
CAS | KS13630 |
品牌 | 科順生物 |
加工定制 | 是 |
樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
自備物品
1. 酶標(biāo)(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL,、2-20uL、20-200uL,、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在2-8℃,,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存,。
3. 預(yù)處理后的樣本無需稀釋,,直接取10μL加樣即可。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液量及順序進(jìn)行溫育操作,。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 96孔 | 48孔 | 無 |
陰性對(duì)照 | 0.3mL | 0.3mL | 無 |
陽性對(duì)照 | 0.3mL | 0.3mL | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無 |
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水,。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,,在吸水紙上拍干,,如此洗板5次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,,浸泡1min,,洗板5次。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置陰、陽性對(duì)照孔和樣本孔,,陰,、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照各50μL,;
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后陰,、陽性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),,在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值,。
結(jié)果判斷
1. 試驗(yàn)有效性:陽性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00;
陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15,。
2. 臨界值(Cut off)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
3. 陰性判斷:樣品OD值<臨界值(Cut off),,樣品為陰性
4. 陽性判斷:樣品OD值>臨界值(Cut off),樣品為陽性
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:陽性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00;陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15,,說明試驗(yàn)結(jié)果有效,。
2. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%,。
4. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存,。
5. 有效期:6個(gè)月
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),,本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
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