| 保存 | 避光低溫保存 |
|---|---|
| 產(chǎn)地 | 上海 |
| 產(chǎn)品等級 | 優(yōu)級品 |
| 產(chǎn)品名稱 | COC1人卵巢癌細胞 |
| 產(chǎn)品用途 | 用于科研研究使用 |
| 執(zhí)行質(zhì)量標準 | 國標 |
| 品牌 | 晶抗生物 |
| 型號 | 細胞株 |
COC1人卵巢癌細胞
細胞名稱: COC1人卵巢癌細胞
種屬來源: 人
組織來源: 卵巢
疾病特征: 卵巢癌
細胞形態(tài): 淋巴母細胞樣
生長特性: 懸浮生長
培 養(yǎng) 基: RPMI-1640，90%,；FBS,，10%。
生長條件: 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃,
傳代方法: 1：2至1：6,，每周2次,。
凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO,，液氮儲存
支原體檢測: 陰性
特點和簡介
COC1細胞建系于1993年。細胞于原代培養(yǎng)至17天傳代,，以后反復傳代,，生物學特性穩(wěn)定?？杀磉_多種腫瘤標志物和型P53蛋白,、突變型P53蛋白,。裸鼠接種產(chǎn)生分化差的腺癌,。
COC1人卵巢癌細胞 接受后處理
1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ,，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們,。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài),，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細胞次日,，請檢查細胞是 否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。
培養(yǎng)操作
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細胞,，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻,，DMSO 終濃度為 10%,，細胞密度不低于1x106/ml,，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,，注意凍 存管做好標識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
COC1人卵巢癌細胞培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系,。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息,，如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基、血清比例,、所 需細胞因子 等,，確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問 題,，責任由客戶自行承擔,。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落,，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察,。此時多數(shù)細胞均 會貼壁,，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常,， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),；如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次,。
4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng),，待細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng),。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài),，便于和我司技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián) 系，告知細胞的具體情況,，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決,。
7.該細胞僅供科研使用。
